Rat NGAL/Lipocalin-2 ELISA kit（大鼠中性粒细胞明胶酶关联脂质输送卵白/脂质输送卵白-2 ）
居品参数
理智度检测界限15.6pg/ml78→5000pg/ml
本试剂盒适用于血清、血浆、组织匀浆、细胞培养上清过甚它生物体液。
检测旨趣
上海威奥生物科技有限公司出产的 ELISA 试剂盒接收“夹心法”:将拿获抗体包被于酶标板上，拿获样品及表率品中的靶卵白，生物素化的检测抗体与靶卵白蚁合， SABC 复合物与生物素化检测抗体蚁合，酿成免疫复合物，加入TMB 显色液后，若反馈孔中有靶卵白则显蓝色，加入断绝液变黄色，检测历程中游离的因素均被洗去，用酶标仪在 450 nm 处测 OD 值，靶卵白浓度与OD 值之间呈正比，通过绘画表率弧线贪图出标本中靶卵白的浓度。
张开剩余72%标本汇集与试剂准备
1.血清、血浆样本汇集应使用一次性的无热原，无内毒素试管（EDTA、柠檬酸盐、肝素抗凝均可），血清、血浆幸免使用溶血，高血脂标本，标本悬浮物应离心去除，使标本表示透明。待测样本应尽早检测，2-8℃保存48小时；更永劫辰须冷冻（-20℃或-80℃）保存，幸免反复冻融。
2.洗涤液确立：用蒸馏水1:20稀释（例：1ml浓缩洗涤液加入19ml的蒸馏水）
3.表率品配制：取8个1.5ml离心管，辨别标注S1,S2,S3,S4,S5,S6,S7,blank,第一管S1中加入表率品/样品稀释液900ul，第二至第八管等辨别加入表率品/样品稀释液200ul，在第一管中加入(500ng/ml)表率品溶液100ul置于旋涡羼杂器上混匀后用加样器吸出200ul，移至第二管，如斯反复作对倍稀释，从第七管中吸出200ul弃去，第八管为空缺对照。
4.生物素化抗体职责液确立:使用前20分钟，用生物素化抗体稀释液将100×生物素化抗体稀释成1×职责液，证实所需用量确立，当日使用，剩余弃之。
5.TMB显色液委果立：使用前10分钟，将TMB显色液A液和B液1：1羼杂，AG百家乐怎么玩才能赢避光摈弃备用。
6.若是您检测的样本中靶卵白浓度高于表率品最高值，提议从头检测，请证实内容情况，符合倍数稀释(提议作念预本质，以细则稀释倍数)。
检测步调
1.加样∶空缺孔加入50ul表率品/样品稀释液，其余孔各加入表率品或待测样品50ul，将反馈板混匀后置37℃，40分钟。
2.洗板∶用1×洗涤液将反馈板充分洗涤4-6次，每孔加入1×洗液350ul，每次颠簸/浸泡1-2分钟，向滤纸上印干。
3.空缺孔加入100ul生物素化抗体稀释液，其余孔各加入1*的生物素化抗体职责液100ul，混匀后置37℃，30分钟。
4.洗板︰同上。
5.每孔加入SABC复合物职责液10Oul，混匀后置37℃，20分钟。
6.洗板︰同上。
7.每孔加入提前确立好的TMB羼杂液100ul，混匀后置37℃暗处反馈10-20分钟(具体显色时辰证实显色效能而定)。
8.每孔加入100ul断绝液，混匀，30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。
刺眼事项
1.在检修中表率品和样本检测时提议作双孔检测，每次检测都应作念表率弧线。
2.洗涤历程很要津，洗涤不充分将导致精准度过错及OD值瑕疵地升高，从雪柜中取出的浓缩洗涤液可能有结晶属于平时表象，37℃水浴使结晶皆备溶化后再配制洗涤液。
3.检测时统共试剂都要规复到室温，板条开封后剩余板条需封好，放回袋中1个月内用完。
4.试剂盒使用超敏TMB溶液，显色过深时会出现千里淀状，属平时表象，混匀即可，不影响效能判读。
5.阐扬书以试剂盒内纸质版为准,本试剂盒仅用于科研ag百家乐网址，弗成用于临床会诊!
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